穿膜融合多肽TAT-N24对结肠癌细胞增殖的影响

doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2010.07.009

穿膜融合多肽TAT-N24对结肠癌细胞增殖的影响

Cell-permeable TAT-N24 Fusion Peptide Inhibiting Proliferation of Colon Cancer Cells

摘要

摘要: 目的：观察穿膜融合多肽TAT-24对结肠癌细胞增殖的影响。方法：观察TAT-N24对HT29细胞内蛋白表达的影响，流式细胞仪检测HT29细胞周期进程，应用BrdU掺入的方法检测TAT-N24对细胞DNA合成的影响，证实TAT-N24的抗肿瘤作用。结果：Western blot结果显示TAT-N24能够有效进入细胞内，TAT-N24处理的细胞内Rb蛋白的表达无显著变化，但可见磷酸化Rb蛋白表达量显著降低。BrdU/PI双掺入法检测细胞DNA合成结果显示，对照组BrdU阳性细胞数占总细胞的比例为(52.2±1.88)%，而TAT-N24组BrdU阳性细胞数占总细胞的比例为(29.9 ±2.14)%，两组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。对照组HT29细胞中G0/G1期细胞为(55.27±2.48)%，S期和G2/M期细胞数分别为(26.97±0.94)%和(17.76±1.77)%，而TAT-N24组HT29细胞G0/G1期细胞减少到(65.10 ± 1.79)%，S期和G2/M期细胞分别为(18.49±0.68)%和(16.40±1.51)%，较对照组差异有统计学意义（P<0.05）。结论：融合多肽TAT-24能有效抑制Rb蛋白磷酸化，阻滞结肠癌HT29细胞周期进程，抑制细胞DNA合成。

Abstract: Objective：To elucidate the role of cell-permeable TAT-N24 fusion peptide inhibiting proliferation of colon cancer cells. Methods ：Detect the cell cycle progression by flow cytometer, analyze the DNA synthesis by BrdU/PI method and certify the roles of TAT-N24 in the tumor. Results ：Western blot shows that TAT-N24 can enter HT29 cells. With the treatment of TAT-N24，the Rb phosphorylation is decreased.In the control group，the number of BrdU positive cells is (52.2±1.88)%, while the TAT-N24 group is (29.9±2.14)%.In control group, cell cycle analysis shows that the number of cells in G0/G1 phases is(55.27± 2.48)%, in S and G2/M phases cells are (26.97±0.94)% and (17.76±1.77)%, but in TAT-N24 group, the number of cells in G0/G1 phases is(65.10±1.79)%, the S and G2/M phases cells are (18.49±0.68)% and (16.40±1.51)%. Conclusion ：TAT-N24 fusion peptide can inhibit the Rb protein phosphorylation, induce the cell cycle arrest and inhibit the DNA synthesis in colon cancer cells.

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