
文章信息
- 魏武,马良,徐延钧,王也煜,李丹,纪爱芳. 2014.
- WEI Wu, MA Liang, XU Yanjun, WANG Yeyu, LI Dan, JI Aifang. 2014.
- 人核黄素转运蛋白RFT2基因单核苷酸多态性与食管鳞癌遗传易感性的关系
- RFT2 Functional SNP Influences Hereditary Susceptibility to Esophageal Squamous Cell Carcinoma
- 肿瘤防治研究, 2014, 41(12): 1348-1351
- Cancer Research on Prevention and Treatment, 2014, 41(12): 1348-1351
- http://www.zlfzyj.com/CN/10.3971/j.issn.1000-8578.2014.12.021
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文章历史
- 收稿日期:2014-01-18
- 修回日期:2014-09-03
2.046000 长治,长治医学院附属和平医院肿 瘤外科
2.Department of Gynecological Oncology, Tumor Hospital of Guangxi Medical University, Nanning 530021, China
2010年我们既往研究中曾对2.5万余食管 鳞癌和正常对照人群进行全基因组关联分析 (GWAS),发现了位于染色体20p13的食管癌 易感基因Chromosome 20 opening reading frame 54 (C20orf54)[1]。C20orf54也被称为人核黄素转运 蛋白2(human riboflavin transporter 2,RFT2),在 人体吸收核黄素的过程中起关键作用,机体缺少核 黄素是食管癌发生的危险因素之一[2]。有研究显示 膳食补充核黄素能明显降低食管癌的患病风险[3]。 目前关于RFT2基因与食管癌遗传易感性关系的报 道很少。本研究初步探讨RFT2基因功能区单核苷 酸多态性与食管癌易感性的关系。 1 资料与方法 1.1 研究对象
2009年—2012年于长治医学院附属和平医院行 胃镜检查并证实无食管、贲门及胃黏膜癌变的健 康人群198例;经病理证实为食管鳞癌患者240例。 1.2 全血基因组DNA提取
Maxwell®16 System提取全血DNA用于PCR反应。 1.3 基因分型
以提取出来的全基因组DNA为模板,扩增目 的片段,引物[4]如下:上游引物:5'-GGAGTTCC CAGAGCTTTGGTGTCCG-3';下游引物:5'-CAT AGGACAGGCAGGAGTAGGT- 3'。PCR产物行2% 琼脂糖凝胶电泳鉴定,将PCR产物送至北京华大 基因科技有限公司直接测序。 1.4 统计学方法
采用SPSS17.0统计学软件分析。对各组人群 SNP1172C>T位点基因型分布进行Hardy-Weinberg 平衡检验,各组间基因型分布频率采用χ2检验,各 基因型与食管癌的易感性关系采用Logistic回归检 验,P<0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 研究人群及特点
食管癌组平均年龄(58.4±7.9)岁;健康对 照组平均年龄(56.9±9.3)岁;各组在年龄、性 别分布上差异均无统计学意义(P=0.076)。食 管癌组和健康对照组在吸烟人数构成方面的差 异无统计学意义,然而,饮酒者在食管癌组中的 比例(46.7%)明显高于健康对照组(37.2%) (P=0.045)。因此饮酒可显著增加人群食管癌 的发病风险,经性别、年龄状况校正后的OR值 为1.78(95%CI:1.12~2.83)。UGIC家族史在 食管癌中的比例(27.5%)明显高于健康对照组 (18.2%)(P=0.014)。因此UGIC家族史可显著 增加人群食管癌的发病风险,经性别、年龄状况 校正后的OR值为1.75(95%CI:1.10~2.79)。不 同BMI指数的人群在食管癌组与健康对照组分布 显著不同(P=0.000),相对于BMI>24的人群, BMI<18.5和BMI为18.5~24之间的人群显著增加 了ESCC的发病风险,经性别、年龄状况校正后 的OR值分别为4.52(95%CI:2.34~8.72)和2.70 (95%CI:1.67~4.37),见表 1。
PCR扩增产物送华大基因科技有限公司测序, 所有样本测序成功,见图 1。
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图 1 RFT2基因SNP1172C>T的各基因型测序结果 Figure 1 DNA sequencing of RFT2 SNP 1172C>T in ESCC patients and healthy controls |
在食管癌和健康对照组中C/C、C/T和T/T各 基因型的频率差异具有统计学意义(χ2=13.10,P =0.001)。对吸烟、饮酒、家族史和体质指数等因 素分层后进行条件Logistic回归分析,结果显示在 不吸烟组中,与C/C相比,C/T和T/T基因型显著降低食管癌发生率(经年龄和性别校正后OR=0.47, 95%CI:0.23~0.97)。在无UGIC家族史的人群 中,与C/C相比,C/T和T/T基因型显著降低食管 癌发生风险性(经年龄和性别校正后的OR=0.57, 95%CI:0.34~0.98)。相反地,在有UGIC家族史 的人群中,C/T和T/T基因型都能增加食管癌发生 的风险性,但是差异无统计学意义,见表 2。
食管癌的发生和发展是环境因素和遗传因素 共同作用影响的结果[5]。有研究表明吸烟和饮酒作 为两个重要的环境因素,在食管癌的发生发展中 起了重要的作用[6];欧阳刚等[7]的研究表明食管癌患者常伴有家族史现象,这说明基因遗传和环境 因素是食管癌高发区发病的危险因素。然而,在 中国的食管癌高发区吸烟与饮酒似乎是食管癌发 生的次要危险因子[8],王立东等[9]对长治地区林州 移民的研究发现,环境和时间变化未明显影响食 管癌及癌前病变的发生率,而是遗传因素对食管 癌的发生发展起重要作用。
本研究发现饮酒、体质指数和家族史与食管 癌的发生发展密切相关,表明RFT2基因的表达与 吸烟饮酒引起的代谢变化相互作用,并进一步影 响食管癌的发生。
在对我国食管癌高发区——河南林州的居民 膳食状况与红细胞谷胱甘肽还原酶活性调查结果 表明:核黄素缺乏是我国食管癌高发区一个共同 的营养问题[10],即高发区人群核黄素摄入不足, 机体内核黄素的水平均低于正常。鉴于此,我国 研究人员先后在食管癌高发区人群中实施核黄素 强化营养盐的干预措施,结果表明核黄素强化营 养盐可增加机体内的核黄素水平,改善食管黏 膜的“状态”,延缓和逆转食管癌前病变的发展进 程,降低食管癌的发病风险及发病率,但干预效 果存在明显的个体差异[9, 11]。我们推测食管癌发生 还可能与RFT2基因功能区的错义cSNP密切相关, RFT2基因功能区的错义cSNP很可能是膳食补充核 黄素所引起的干预效果存在明显个体差异的分子 基础。本研究分析了RFT2基因的SNP1172C>T位 点的突变情况,发现食管癌患者中1172C>T位点 C/C基因型更为常见,这表明在食管癌发生发展过 程中,随着食管癌关键易感基因的突变,RFT2基 因会发挥相对增强核黄素转运的能力,促进食管 黏膜修复。
此外,RFT2基因1172C>T位点杂合子较纯 合子罹患食管癌的风险显著降低,可能为在长期 的人类进化过程中,人类与自然不断斗争适应环 境进而生存的结果。我们的研究显示RFT2基因 1172C>T位点在不吸烟组中杂合子较纯合子罹患 食管癌的风险显著降低,可能也是人类进化的一 种体现。RFT2基因1172C>T位点在无UGIC家族史 的人群中,杂合子较纯合子罹患食管癌的风险显 著降低,但在有UGIC家族史的人群中,RFT2基因 1172C>T位点C/T和T/T基因型都能增加食管癌发生 的风险,但是差异无统计学意义,提示遗传背景 因素在食管癌发生发展中也可能起重要作用。
总之,我们的初步研究显示RFT2基因功能区 SNP1172C>T 位点与食管癌遗传易感性相关。
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